Caracterización molecular de cepas de influenza A (H1N1) 2009 de casos leves y graves de la Argentina

Fil: Cisterna, Daniel. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas; Argentina.Fil: Campos, Ana. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas; Argentina.Fil: Pontoriero, Andrea. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas; Argentina.Fil: Alonio, Virginia. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas; Argentina.Fil: Molina, Viviana. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas; Argentina.Fil: Palacios, Gustavo. Columbia University. Center for Infection and Immunity; Estados Unidos.Fil: Solovyov, Alexander. Columbia University. Center for Infection and Immunity; Estados Unidos.Fil: Hui, Jeffrey. Columbia University. Center for Infection and Immunity; Estados Unidos.Fil: Savji, Nazir. Columbia University. Center for Infection and Immunity; Estados Unidos.Fil: Bussetti, Ana Valeria. Columbia University. Center for Infection and Immunity; Estados Unidos.Fil: Jabado, Omar J. Columbia University. Center for Infection and Immunity; Estados Unidos.Fil: Street, Craig. Columbia University. Center for Infection and Immunity; Estados Unidos.Fil: Hirschberg, David L. Columbia University. Center for Infection and Immunity; Estados Unidos.Fil: Rabadan, Raul. Columbia University. Department of Biomedical Informatics; Estados UnidosFil: Hutchison, Stephen. 454 Life Sciences; Estados UnidosFil: Egholm, Michael. 454 Life Sciences; Estados Unidos.Fil: Lipkin, W. Ian. Columbia University. Center for Infection and Immunity; Estados Unidos.Fil: Baumeister, Elsa. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas; ArgentinaWhile worldwide pandemic influenza A(H1N1) pdm case fatality rate (CFR) was 0.4%, Argentina’s was 4.5%. A total of 34 strains from mild and severe cases were analyzed. A full genome sequencing was carried out on 26 of these, and a partial sequencing on the remaining eight. We observed no evidence that the high CFR can be attributed to direct virus changes. No evidence of re-assortment, mutations associated with resistance to antiviral drugs, or genetic drift that might contribute to virulence was observed. Although the mutation D225G associated with severity in the latest reports from the Ukraine and Norway is not observed among the Argentine strains, an amino acid change in the area (S206T) surrounding the HA receptor binding domain was observed, the same previously established worldwide. (ES) Mientras que la tasa de letalidad (CFR) para (H1N1)pdm en todo el mundo era del 0.4%, en la Argentina la mortalidad observada fue de 4.5%. La secuenciación del genoma completo de 26 cepas de virus argentinos de influenza A (H1N1)pdm de casos leves y graves y de 8 cepas secuenciadas parcialmente no mostró evidencia de que la elevada tasa de letalidad se pueda atribuir directamente a cambios en el virus. No se encontraron hallazgos de recombinación, de mutaciones asociadas con la resistencia a los medicamentos antivirales ni de variaciones genéticas que puedan contribuir a la virulencia observada. Si bien la mutación D225G asociada con la gravedad, comunicada en informes procedentes de Ucrania y Noruega, no se ha encontrado en las cepas argentinas estudiadas, se ha observado un cambio aminoacídico en la región (S206T) en torno al dominio del sitio de unión al receptor en la HA, el mismo hallado en cepas distribuidas alrededor del mundo

A semiquantitative PCR method (SQ-PCR) to measure Epstein-Barr virus (EBV) load: its application in transplant patients

Fil: Fellner, María Dolores. ANLIS Dr. C. G. Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas (INEI). Servicio Virus Oncogénicos; Argentina.Fil: Durand, Karina. ANLIS Dr. C. G. Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas (INEI). Servicio Virus Oncogénicos; Argentina.Fil: Correa, Mariel. ANLIS Dr. C. G. Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas (INEI). Servicio Virus Oncogénicos; Argentina.Fil: Bes, David. Hospital Nacional de Pediatría "Prof. Juan P. Garrahan"; Buenos Aires, Argentina.Fil: Alonio, Lidia V. ANLIS Dr. C. G. Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas (INEI). Servicio Virus Oncogénicos; Argentina.Fil: Teyssié, Angélica R. ANLIS Dr. C. G. Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas (INEI). Servicio Virus Oncogénicos; Argentina.Fil: Picconi, María Alejandra. ANLIS Dr. C. G. Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas (INEI). Servicio Virus Oncogénicos; Argentina.Background: High Epstein-Barr virus load has been related to an increased risk of Posttransplant Lymphoproliferative Disorders (PTLD) in transplant recipients. Objectives: Development of a method to quantitate EBV DNA levels in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and evaluate its usefulness in transplant patients. Study design: We designed a semiquantitative nested PCR based on a limiting dilution analysis to detect high viral loads in PBMC. This method was applied to 25 healthy carriers, and 85 solid organ transplant recipients as follows: (A) 53 asymptomatic patients; (B) 24 symptomatic patients; (C) eight patients with PTLD. Results: In healthy carriers the reciprocal of the limiting dilution (RLD) ranged between non-detected (ND) and 1, the median RLD was ND, which is equivalent to a viral load of <1 copy per 10(5) PBMC. In the transplant population the medians RLD (range) were: (A) asymptomatic group: ND (ND-64), median equivalent to a viral load of <1 copy per 10(5) PBMC; (B) symptomatic group: 4 (ND-256), median equivalent to a range of viral load of 4-64 copies per 10(5) PBMC. (C) PTLD group: 256 (16-16384), median equivalent to a range of viral load of 256-4096 copies per 10(5) PBMC. Statistically significant differences were found between all groups: A+B vs. C (P<0.0001); A vs. B (P<0.0001); A vs. C (P<0.0001), B vs. C (P<0.0001). We also observed a good correlation between viral loads and clinical findings in four follow-up patients. Considering the RLD=256 as a cutoff point to detect transplant patients with PTLD, resulted in sensitivity 75%, specificity 96.7%, positive predictive value 60%, negative predictive value 98.3%. Conclusion: This SQ-PCR method enables us to differentiate between transplant patients with and without PTLD; therefore, it could be applied as a marker for early detection of this pathology

Human Papilloma virus in Quechua women from Jujuy with high frequency of cervical cancer: viral types and HPV-16 variants

Fil: Picconi, María Alejandra. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología; Argentina.Fil: Gronda, Jorge. Centro de Estudios Ginecológicos; Argentina.Fil: Alonio, Lidia V. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología; Argentina.Fil: Villa, Luisa L. Instituto Ludwig de Investigación sobre Cáncer. Departamento Virología; Brasil.Fil: Sichero, Laura. Instituto Ludwig de Investigación sobre Cáncer. Departamento Virología; Brasil.Fil: Miranda, Sergio. Centro de Estudios Ginecológicos; Argentina.Fil: Barcena, Martín. Centro de Estudios Ginecológicos; Argentina.Fil: Teyssie. Angelica. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología; Argentina.Los virus papiloma humanos (HPV) están asociados etiológicamente con el carcinoma cervical. A fin de evaluar la infección por HPV y su relación con la elevada frecuencia de esta neoplasia en mujeres quechuas jujeñas, se estudiaron 271 muestras de cérvix provenientes de lesiones preneoplásicas y neoplásicas (biopsias) y controles normales (citologías). Se realizó la detección y tipificación viral empleando PCR-RFLP o PCRhibridación y se analizó la variabilidad de HPV16 en los genes L1 y E6 por PCR-hibridación. Se detectó HPV en el 52% de los controles, 91% de lesiones de bajo grado, 97% de alto grado y 100% de carcinomas invasores, correspondiendo el 55% al HPV16. Las variantes de HPV16 fueron predominantemente europeas, en su mayoría no prototípicas. La alta tasa de infección con virus de alto riesgo y la gran proporción de variantes no prototípicas de HPV16 asociadas con un mayor potencial oncogénico podrían explicar, en parte, la elevada frecuencia de cáncer cervical en esta población. Los datos obtenidos podrían contribuir al control de la enfermedad y a la formulación de vacunas. Human Papillomaviruses (HPVs) are etiologically associated to cervical carcinoma. In order to evaluate HPV infection and its relationship with the high frequency of this neoplasia in Quechua women from Jujuy (Argentina), 271 cervical samples from preneoplastic and neoplastic lesions (biopsies) and normal controls (cytologies) were studied. Detection and typing were performed using PCR-RFLP or PCRhybridization and the HPV-16 variability in L1 and E6 genes (by PCR-hybridization) was analysed. HPV was detected in 52% of controls, 91% of low-grade lesions, 97% of high-grade lesions and 100% of invasive carcinomas, corresponding 55% to HPV-16. HPV-16 European variants were predominant, most of them being non-prototypic strains. The high frequency of high risk infection types and the raised proportion of HPV-16 non-prototypic variants related to a greater oncogenic potential could explain, in part, the high cervical cancer frequency of this native population. These data may contribute to disease control and vaccinal formulation

Human Papilloma virus in Quechua women from Jujuy with high frequency of cervical cancer: viral types and HPV-16 variants

Fil: Picconi, María Alejandra. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología; Argentina.Fil: Gronda, Jorge. Centro de Estudios Ginecológicos; Argentina.Fil: Alonio, Lidia V. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología; Argentina.Fil: Villa, Luisa L. Instituto Ludwig de Investigación sobre Cáncer. Departamento Virología; Brasil.Fil: Sichero, Laura. Instituto Ludwig de Investigación sobre Cáncer. Departamento Virología; Brasil.Fil: Miranda, Sergio. Centro de Estudios Ginecológicos; Argentina.Fil: Barcena, Martín. Centro de Estudios Ginecológicos; Argentina.Fil: Teyssie. Angelica. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología; Argentina.Los virus papiloma humanos (HPV) están asociados etiológicamente con el carcinoma cervical. A fin de evaluar la infección por HPV y su relación con la elevada frecuencia de esta neoplasia en mujeres quechuas jujeñas, se estudiaron 271 muestras de cérvix provenientes de lesiones preneoplásicas y neoplásicas (biopsias) y controles normales (citologías). Se realizó la detección y tipificación viral empleando PCR-RFLP o PCRhibridación y se analizó la variabilidad de HPV16 en los genes L1 y E6 por PCR-hibridación. Se detectó HPV en el 52% de los controles, 91% de lesiones de bajo grado, 97% de alto grado y 100% de carcinomas invasores, correspondiendo el 55% al HPV16. Las variantes de HPV16 fueron predominantemente europeas, en su mayoría no prototípicas. La alta tasa de infección con virus de alto riesgo y la gran proporción de variantes no prototípicas de HPV16 asociadas con un mayor potencial oncogénico podrían explicar, en parte, la elevada frecuencia de cáncer cervical en esta población. Los datos obtenidos podrían contribuir al control de la enfermedad y a la formulación de vacunas. Human Papillomaviruses (HPVs) are etiologically associated to cervical carcinoma. In order to evaluate HPV infection and its relationship with the high frequency of this neoplasia in Quechua women from Jujuy (Argentina), 271 cervical samples from preneoplastic and neoplastic lesions (biopsies) and normal controls (cytologies) were studied. Detection and typing were performed using PCR-RFLP or PCRhybridization and the HPV-16 variability in L1 and E6 genes (by PCR-hybridization) was analysed. HPV was detected in 52% of controls, 91% of low-grade lesions, 97% of high-grade lesions and 100% of invasive carcinomas, corresponding 55% to HPV-16. HPV-16 European variants were predominant, most of them being non-prototypic strains. The high frequency of high risk infection types and the raised proportion of HPV-16 non-prototypic variants related to a greater oncogenic potential could explain, in part, the high cervical cancer frequency of this native population. These data may contribute to disease control and vaccinal formulation

Physical status of the E2 human papilloma virus 16 viral gene in cervical preneoplastic and neoplastic lesions

Fil: Tonon, Sergio Andrés. Universidad Nacional de Misiones. Facultad de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales. Laboratorio de Biologia Molecular Aplicada; Argentina.Fil: Picconi, María Alejandra. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología. Servicio Virus Oncogénicos; Argentina.Fil: Bos, P. D. Universidad Nacional de Misiones. Facultad de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales. Laboratorio de Biologia Molecular Aplicada; Argentina.Fil: Zinovich, Jorge Bruno. Universidad Nacional de Misiones. Facultad de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales. Laboratorio de Biologia Molecular Aplicada; Argentina.Fil: Galuppo, Juan Antonio. Universidad Nacional de Misiones. Facultad de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales. Laboratorio de Biologia Molecular Aplicada; Argentina.Fil: Alonio, Lidia Virginia. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología. Servicio Virus Oncogénicos; Argentina.Fil: Teyssie, Angelica R. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología. Servicio Virus Oncogénicos; Argentina.Integration of human papilloma virus (HPV) 16 DNA is considered an important genetic change in cervical lesion progression towards ICC. The viral E2 gene is often disrupted by this process, releasing suppression of viral E6/E7 oncogenes, a key factor for oncogenic progression. Objectives: To evaluate the physical status of HPV 16 E2 gene in cervical preneoplastic and neoplastic lesions and its relation with lesion severity. Study design: A sensitive PCR approach for the detection of an intact E2 HPV 16 gene in infected epithelial cells from the cervix with low grade squamous intraepithelial lesion (LGSIL), high grade squamous intraepithelial lesion (HGSIL) and invasive cervical carcinoma (ICC) diagnosis was applied. The correlation between gene disruption and lesion stage was examined. Results: Sixty-two LGSIL, 39 HGSIL and 24 ICC samples were analyzed. Fifty-seven LGSIL [92%], 13 HGSIL [33%] and 4 ICC [17%] showed results compatible with an intact E2 gene, while 5 LGSIL [8%], 26 HGSIL [67%] and 20 ICC [83%] samples gave no signal. Conclusions: HPV 16 E2 gene disruption showed a positive correlation with cervical lesion progression, particularly from LGSIL to HGSIL. Although additional genetic events are very likely to be needed for HGSIL to ICC progression, the E2 gene disruption is a putative early marker to consider in the prognostic analysis of HPV 16 chronically infected women

Molecular variants of human papillomavirus (HPV) types 16 and 18 in adenocarcinomas of the cervix

Fil: Picconi, María Alejandra. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología; Argentina.Fil: Alonio, Lidia V. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología; Argentina.Fil: García Carrancá, Alejandro. Universidad Nacional Autónoma de México. Departamento de Biología Molecular; México.Fil: Lizano, Marcela. Instituto Nacional de Cancerología; México.Fil: Cervantes Vazquez, Guadalupe. Instituto Nacional de Cancerología; México.Fil: Distéfano, Angélica. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología; Argentina.Fil: Mural, Juan. Hospital Nacional Profesor Alejandro Posadas; Argentina.Fil: Bazan, Juan. Hospital Nacional Profesor Alejandro Posadas; Argentina.Fil: Teyssie, Angelica R. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología; Argentina.Los virus Papiloma humano (HPV), en particular los tipos 16 y 18, son considerados carcinógenos humanos, habiéndose demostrado una asociación etiológica entre la infección con estos virus y el desarrollo del cáncer de cuello uterino. El rol viral en el carcinoma escamoso ha sido ampliamente estudiado aunque la información disponible en relación al adenocarcinoma es mucho menor, en parte debido a su baja frecuencia. En este trabajo investigamos la presencia de tipos y variantes intratípicas de HPV en adenocarcinomas de cérvix. Se incluyeron 23 biopsias de archivo, fijadas y embebidas en parafina. La detección y tipificación viral se llevó a cabo mediante PCR genérica y posterior análisis de polimorfismos conformacionales de cadena simple (SSCP). La variabilidad genética se investigó en un fragmento de 450 pb del gen L1, mediante la secuenciación directa post-PCR. Se detectaron 11 muestras positivas para HPV 16 (9 prototipos y 2 variantes: 1 europea y 1 asiática-americana), 10 para HPV 18 (9 prototipos y 1 variante europea), 1 para HPV 31 y 1 negativa. Se confirmó la asociación de HPV de alto riesgo con esta neoplasia, con una alta prevalencia (43%) de HPV 18 pero sin un predominio sobre los demás tipos virales, como fue publicado previamente. La variabilidad demostrada en epítopes de la proteína L1 originaron cambios aminoacídicos que podrían tener implicancias en la repuesta inmune y por lo tanto ser considerados en el diseño de vacunas. Human Papillomavirus (HPV), particularly types 16 and 18, are considered human carcinogens since an etiological association has been demonstrated between these viruses and the development of cervical cancer. While the viral role in squamous carcinoma has been largely studied, the information available on adenocarcinoma is scarce, partly because of its lower frequency. In this paper we investigated the presence of HPV types and intratype variants in adenocarcinomas of the cervix. A total of 23 archive samples, fixed and paraffin embedded biopsies, were included. The detection and viral typing was performed by generic PCR and subsequent single stranded conformational polymorphism analysis (SSCP). Genetic variability was investigated in a 450 bpfragment corresponding to L1 gene by post-PCR direct sequencing. We detected 11 HPV 16 positive samples (9 prototypes and 2 variants: 1 European and 1 Asiatic-American), 10 HPV 18 (9 prototypes and 1 European variant), 1 HPV 31 and 1 negative. The high risk HPV association with this neoplasia was confirmed with a high prevalence (43%) of HPV 18, (but) without predominance over the other types as previously published. The demonstrated variability in L1 protein epitopes originated aminoacidic changes which could have implications on the immune response and therefore should be considered in a vaccine design

Molecular variants of human papillomavirus (HPV) types 16 and 18 in adenocarcinomas of the cervix

Fil: Picconi, María Alejandra. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología; Argentina.Fil: Alonio, Lidia V. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología; Argentina.Fil: García Carrancá, Alejandro. Universidad Nacional Autónoma de México. Departamento de Biología Molecular; México.Fil: Lizano, Marcela. Instituto Nacional de Cancerología; México.Fil: Cervantes Vazquez, Guadalupe. Instituto Nacional de Cancerología; México.Fil: Distéfano, Angélica. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología; Argentina.Fil: Mural, Juan. Hospital Nacional Profesor Alejandro Posadas; Argentina.Fil: Bazan, Juan. Hospital Nacional Profesor Alejandro Posadas; Argentina.Fil: Teyssie, Angelica R. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología; Argentina.Los virus Papiloma humano (HPV), en particular los tipos 16 y 18, son considerados carcinógenos humanos, habiéndose demostrado una asociación etiológica entre la infección con estos virus y el desarrollo del cáncer de cuello uterino. El rol viral en el carcinoma escamoso ha sido ampliamente estudiado aunque la información disponible en relación al adenocarcinoma es mucho menor, en parte debido a su baja frecuencia. En este trabajo investigamos la presencia de tipos y variantes intratípicas de HPV en adenocarcinomas de cérvix. Se incluyeron 23 biopsias de archivo, fijadas y embebidas en parafina. La detección y tipificación viral se llevó a cabo mediante PCR genérica y posterior análisis de polimorfismos conformacionales de cadena simple (SSCP). La variabilidad genética se investigó en un fragmento de 450 pb del gen L1, mediante la secuenciación directa post-PCR. Se detectaron 11 muestras positivas para HPV 16 (9 prototipos y 2 variantes: 1 europea y 1 asiática-americana), 10 para HPV 18 (9 prototipos y 1 variante europea), 1 para HPV 31 y 1 negativa. Se confirmó la asociación de HPV de alto riesgo con esta neoplasia, con una alta prevalencia (43%) de HPV 18 pero sin un predominio sobre los demás tipos virales, como fue publicado previamente. La variabilidad demostrada en epítopes de la proteína L1 originaron cambios aminoacídicos que podrían tener implicancias en la repuesta inmune y por lo tanto ser considerados en el diseño de vacunas. Human Papillomavirus (HPV), particularly types 16 and 18, are considered human carcinogens since an etiological association has been demonstrated between these viruses and the development of cervical cancer. While the viral role in squamous carcinoma has been largely studied, the information available on adenocarcinoma is scarce, partly because of its lower frequency. In this paper we investigated the presence of HPV types and intratype variants in adenocarcinomas of the cervix. A total of 23 archive samples, fixed and paraffin embedded biopsies, were included. The detection and viral typing was performed by generic PCR and subsequent single stranded conformational polymorphism analysis (SSCP). Genetic variability was investigated in a 450 bpfragment corresponding to L1 gene by post-PCR direct sequencing. We detected 11 HPV 16 positive samples (9 prototypes and 2 variants: 1 European and 1 Asiatic-American), 10 HPV 18 (9 prototypes and 1 European variant), 1 HPV 31 and 1 negative. The high risk HPV association with this neoplasia was confirmed with a high prevalence (43%) of HPV 18, (but) without predominance over the other types as previously published. The demonstrated variability in L1 protein epitopes originated aminoacidic changes which could have implications on the immune response and therefore should be considered in a vaccine design

Carga de virus Epstein-Barr en pacientes trasplantados: detección temprana de desórdenes linfoproliferativos postrasplante

Fil: Fellner, María Dolores. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas; Argentina.Fil: Durand, Karina A. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas; Argentina.Fil: Solernou, Veronica. "Prof. Dr. Juan. P. Garrahan" National Pediatrics Hospital. Pathology Service; Argentina.Fil: Bosaleh, Andrea. "Prof. Dr. Juan. P. Garrahan" National Pediatrics Hospital. Pathology Service; Argentina.Fil: Balbarrey, Ziomara. "Prof. Dr. Juan. P. Garrahan" National Pediatrics Hospital. Pathology Service; Argentina.Fil: García de Dávila, María T. "Prof. Dr. Juan. P. Garrahan" National Pediatrics Hospital. Pathology Service; Argentina.Fil: Rodríguez, Marcelo. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas; Argentina.Fil: Irazu, Lucía. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas; Argentina.Fil: Alonio, Lidia V. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas; Argentina.Fil: Picconi, María A. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas; Argentina.High levels of circulating EBV load are used as a marker of post-transplant lymphoproliferative disorders (PTLD). There is no consensus regarding the threshold level indicative of an increase in peripheral EBV DNA. The aim of the study was to clinically validate a developed EBV quantification assay for early PTLD detection. Transversal study: paired peripheral blood mononuclear cells (PBMC), plasma and oropharyngeal lymphoid tissue (OLT) from children undergoing a solid organ transplant with (n=58) and without (n=47) PTLD. Retrospective follow-up: 71 paired PBMC and plasma from recipients with (n=6) and without (n=6) PTLD history. EBV load was determined by real-time PCR. The diagnostic ability to detect all PTLD (categories 1-4), advanced PTLD (categories 2-4) or neoplastic PTLD (categories 3 and 4) was estimated by analyzing the test performance at different cut-off values or with a load variation greater than 0.5log units. The higher diagnostic performance for identifying all, advanced or neoplastic PTLD, was achieved with cut-off values of 1.08; 1.60 and 2.47log EBVgEq/10(5) PBMC or 2.30; 2.60; 4.47loggEq/10(5) OLT cells, respectively. EBV DNA detection in plasma showed high specificity but low (all categories) or high (advanced/neoplastic categories) sensitivity for PTLD identification. Diagnostic performance was greater when: (1) a load variation in PBMC or plasma was identified; (2) combining the measure of EBV load in PBMC and plasma. The best diagnostic ability to identify early PTLD stages was achieved by monitoring EBV load in PBMC and plasma simultaneously; an algorithm was proposed

Human papillomavirus cervical infection in Guarani Indians from the rainforest of Misiones, Argentina

To evaluate the prevalence of human papillomavirus (HPV) cervical infection in women from the South American Guarani Indian tribe located in the rain forest of Misiones, north-eastern Argentina; a region with a high incidence of cervical carcinoma. Methods: A cross-sectional cytological and HPV screening of sexually active Guarani women from nine Indian settlements was conducted. Demographic data, information about sexual behavior, and gynaecological history were recorded. Fresh cervical specimens from 239 patients were collected, of which 207 were included in this study. Cytology and microbiological detection were carried out by the Papanicolaou and Gram stain methods, respectively. HPV detection and typing were analyzed by PCR and RFLP. Results: Pap smears in 96% of all patients showed an inflammatory pattern. A possible etiologic agent was found in 58% of cases: 52% Trichomonas vaginalis, 35% Gardnerella vaginalis and 13% Candida sp. Seven cases had cytological changes compatible with Low Grade Intraepithelial Lesion (LGSIL), one with High Grade Intraepithelial Lesion (HGSIL) and one in situ cervical cancer. The prevalence for generic HPV infection was 64% (133/207). Genotyping gave a 26% prevalence for HPV types 16/18, 13% for types 6/11 and 30% for other types, with nine mixed infections. Conclusion: This work reports for the first time the prevalence of cervical HPV infection in Guarani women. Nearly all Guarani women had some grade of cervical disease. Generic HPV infection prevalence was elevated (64%), with predominance of high risk types 16/18. A large variety of viral types was detected, including high to intermediate risk types not found previously in the region.Fil: Tonon, Sergio Andrés. Universidad Nacional de Misiones. Laboratorio de Biología Molecular Aplicada; Argentina.Fil: Picconi, María Alejandra. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio Virus Oncogénicos; Argentina.Fil: Zinovich, Jorge Bruno. Universidad Nacional de Misiones. Laboratorio de Biología Molecular Aplicada; Argentina.Fil: Nardari, Wanda. Ministerio de Salud Pública de la Provincia de Misiones; Argentina.Fil: Mampaey, Mariana. Ministerio de Salud Pública de la Provincia de Misiones; Argentina.Fil: Badano, Inés. Universidad Nacional de Misiones. Laboratorio de Biología Molecular Aplicada; Argentina.Fil: di Lello, Federico. Universidad Nacional de Misiones. Laboratorio de Biología Molecular Aplicada; Argentina.Fil: Galuppo, Juan Antonio. Universidad Nacional de Misiones. Cátedra de Citología e Histología; Argentina.Fil: Alonio, Lidia Virginia. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio Virus Oncogénicos; Argentina.Fil: Teyssie, Angélica Rita. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio Virus Oncogénicos; Argentina